Microplate Reader untuk Uji Antioksidan

Microplate reader adalah alat yang digunakan dalam berbagai aplikasi laboratorium, termasuk analisis antioksidan. Microplate reader sering digunakan untuk mengukur aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode yang disebut assay radikal bebas atau assay peredaman radikal bebas.

Berikut adalah langkah-langkah umum dalam menggunakan microplate reader untuk analisis antioksidan:

1. Persiapan sampel: Ambil sampel yang ingin dianalisis, seperti ekstrak tumbuhan, makanan, atau suplemen antioksidan. Sampel tersebut mungkin perlu diolah sebelumnya, seperti ekstraksi atau pemurnian, sesuai dengan metode yang Anda gunakan.

2. Persiapan mikroplat: Siapkan mikroplat dengan memasukkan sampel Anda ke dalam sumuran atau brankas mikroplat yang sesuai. Pastikan pengaturan yang benar untuk pengujian dan kontrol yang tepat. Biasanya, Anda akan menggunakan beberapa brankas mikroplat untuk melakukan berbagai pengujian dan kontrol.

3. Persiapan reagen: Siapkan larutan reagen yang diperlukan sesuai dengan metode yang digunakan. Ini mungkin melibatkan pengenceran sampel, persiapan larutan standar, atau penambahan reagen khusus lainnya. Pastikan Anda mengikuti instruksi metode yang digunakan dengan seksama.

4. Pengukuran: Tempatkan mikroplat di dalam microplate reader dan ikuti petunjuk perangkat lunak yang disediakan. Biasanya, Anda akan mengatur parameter pengukuran, seperti panjang gelombang (biasanya dalam rentang UV-vis), waktu inkubasi, dan temperatur yang diperlukan.

5. Analisis data: Setelah pengukuran selesai, perangkat lunak microplate reader akan menghasilkan data berdasarkan absorbansi atau fluoresensi yang diukur. Gunakan perangkat lunak tersebut untuk menganalisis data Anda dan menghitung aktivitas antioksidan berdasarkan kurva kalibrasi atau metode yang sesuai.

Penting untuk dicatat bahwa metode analisis antioksidan dengan microplate reader dapat bervariasi tergantung pada tujuan penelitian atau metode yang digunakan. Pastikan untuk mengacu pada literatur yang sesuai atau petunjuk produsen untuk petunjuk yang lebih rinci sesuai dengan kebutuhan Anda

Berikut adalah beberapa referensi atau daftar pustaka yang dapat digunakan sebagai sumber informasi tentang penggunaan microplate reader dalam pengukuran antioksidan:

1. Prior RL, Wu X, Schaich K. Standardized methods for the determination of antioxidant capacity and phenolics in foods and dietary supplements. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2005;53(10):4290-4302.

2. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radical Biology and Medicine. 1999;26(9-10):1231-1237.

3. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity. Lebensmittel-Wissenschaft und -Technologie. 1995;28(1):25-30.

4. Benzie IF, Strain JJ. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of "antioxidant power": The FRAP assay. Analytical Biochemistry. 1996;239(1):70-76.

5. Re R, Nucci L, Pellegrini N, Proteggente A, Yang M, Rice-Evans C. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radical Biology and Medicine. 1999;26(9-10):1231-1237.

6. Miller NJ, Rice-Evans C, Davies MJ, Gopinathan V, Milner A. A novel method for measuring antioxidant capacity and its application to monitoring the antioxidant status in premature neonates. Clinical Science. 1993;84(4):407-412.

7. Ou B, Huang D, Hampsch-Woodill M, Flanagan JA, Deemer EK. Analysis of antioxidant activities of common vegetables employing oxygen radical absorbance capacity (ORAC) and ferric reducing antioxidant power (FRAP) assays: A comparative study. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2002;50(11):3122-3128.

8. Halliwell B, Gutteridge JMC. Free Radicals in Biology and Medicine. 4th edition. Oxford: Oxford University Press; 2007.

9. Lobo V, Patil A, Phatak A, Chandra N. Free radicals, antioxidants and functional foods: Impact on human health. Pharmacognosy Reviews. 2010;4(8):118-126.

10. Valko M, Leibfritz D, Moncol J, Cronin MTD, Mazur M, Telser J. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 2007;39(1):44-84.

Pastikan untuk mengacu pada referensi yang sesuai dengan kebutuhan spesifik Anda dan gunakan gaya kutipan yang sesuai.